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细胞名称 小鼠脑瘤细胞;BC3H1
形态特性 多角
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞来源于小鼠平滑肌样肿瘤组织;可产生腺苷酸磷酸激酶和肌酸磷酸激酶;表达乙酰受体和H-2K,类似骨骼肌细胞分化停滞的状态,而非平滑肌细胞;鼠痘病毒阴性。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 20%FBS
传代方法 1:2~1:10传代;每周换液2次。
传代情况 P18
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR -
同工酶
染色体
使用权限 A类小鼠脑瘤细胞;BC3H1
实验方法和步骤
(一) 前处理 用台称称量青蛙或蟾蜍的体重,然后按10微克/克动物体重的剂量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小时后,将动物处死,用剪刀剪开皮肤和肌肉,取出大腿骨和胫骨,剔净股骨上的肌肉,然后用一小块纱布来回搓干净。剪开两端股骨,用注射器(内装5ml 1% 柠檬酸钠溶液)缓慢冲洗骨髓细胞到离心管中,经平衡后离心8分钟,速度为1000转/分钟。
(三) 低渗 吸去上清液,留沉淀物0.2ml,加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度,用吸管冲匀沉淀物,在恒温水浴(28℃)处理20分钟或更长一点时间。
(四) 固定 低渗后,以每分钟1000转速度离心10分钟。用吸管小心吸去上清液,留0.2ml沉淀物,冲散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 冲匀后静止固定20分钟。重复固定1~2次,离心的速度与时间以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加4滴新配的固定液,冲匀沉淀物。从冰箱取出预先冷冻的载片,每片滴3滴细胞悬液,立即用嘴向载片上吹气,使细胞均匀分散,在酒精灯火焰上来回烤一下,以助染色体更好分散和展开。 (六) 染色 用10:1 Giemsa染液染色20分钟(Giemsa原液用PH=6.8磷酸缓冲液稀释),然后用水冲洗,片干后镜检。 (七) 镜检 在中倍镜下找染色体分散好的中期分裂相,转至高倍镜详细观察两栖类染色体的数目,属于大、中、小染色体各有多少条。
注意事项:
1.收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们。
2.收到细胞先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时(视细胞密度而定)稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时就整体外观拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,随后在显微镜下拍下细胞状态,100*,200*各一张),观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。
3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响,故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态,故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明,期间间隔时间不能大于7天。
4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
人促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)elisa试剂盒 Human corticotropin-releasing factor, CRF 96T/48T
人/1-去氨基-8-右旋-加压素(dDAVP)elisa试剂盒 Human /1-desamino-8-D-arginine vasopressin, dDAVP Elisa Kit 96T/48T
人毒蕈碱型乙酰受体亚型M3(M-AChR M3)elisa试剂盒 Human muscarinic acetylcholine receptor M3, M-AChR M3 Elisa Kit 96T/48T
人睾酮受体(TR)elisa试剂盒 Human Testoterone recepter, TR Elisa Kit 96T/48T
人毒蕈碱型乙酰受体(M-AChR)elisa试剂盒 Human muscarinic acetylcholine receptor, M-AChR Elisa Kit 96T/48T
人糖蛋白49A(Gp49a)elisa试剂盒 human glycoprotein 49A, Gp49a Elisa Kit 96T/48T
人抑制素β-B(Inhbb)elisa试剂盒 human inhibin beta-B, Inhbb Elisa Kit 96T/48T
人食欲素受体(OXR)elisa试剂盒 Human Orexin receptor, OXR Elisa Kit 96T/48T
人生长激素释放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)elisa试剂盒 Human growth hormone releasing peptide-Ghrelin, GHRP-Ghrelin Elisa Kit 96T/48T
人钙调素(CAM)elisa试剂盒 Human calmodulin, CAM Elisa Kit 96T/48T
人真胰岛素(TI)elisa试剂盒 Human true insulin, TI Elisa Kit 96T/48T
人重酒石酸(NE-B)elisa试剂盒 Human Noradrenaline Bitartas, NE-B Elisa Kit 96T/48T
人前列环素(PGI)elisa试剂盒 Human prostacycline, PGI Elisa Kit 96T/48T
人降钙素原(PCT)elisa试剂盒 Human Procalcitonin, PCT Elisa Kit 96T/48T
人6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)elisa试剂盒 Human 6-keto-prostaglandin F1a, 6-K-PGF1a Elisa Kit 96T/48T
人戊糖素(Pentosidine)elisa试剂盒 Human Pentosidine Elisa Kit 96T/48T
人变肾上腺素(MN) elisa试剂盒 Human metanephrine, MN Elisa Kit 96T/48T
人多巴胺D1受体(D1R)elisa试剂盒 Human Dopamine D1 receptor, D1R Elisa Kit 96T/48T
人肾上腺素能a1A受体(ADRA1A)elisa试剂盒 Human adrenergic alpha-1A receptor, ADRA1A Elisa Kit 96T/48T
人早老素2(PS-2)elisa试剂盒 Human Presenilin 2, PS-2 Elisa Kit 96T/48T
人异丙肾上腺素(iso-Hyd)elisa试剂盒 Human Isoprenaline Hydrochloride, iso-Hyd Elisa Kit 96T/48T
人胰抑制素(Pancreastatin)elisa试剂盒 Human Pancreastatin Elisa Kit 96T/48T
人雄激素受体(AR)elisa试剂盒 Human androgen receptor, AR Elisa Kit 96T/48T
人松弛肽/松弛素(RLN)elisa试剂盒 Human Relaxin, RLN Elisa Kit 96T/48T
人生长激素结合蛋白(GHBP)elisa试剂盒 Human Growth Hormone Binding Protein, GHBP Elisa Kit 96T/48T
人肾上腺髓质素(ADM)elisa试剂盒 Human adrenomedullin, ADM Elisa Kit 96T/48T
人免疫反应性生长激素(irGH)elisa试剂盒 Human Immunoreactive growth hormone, irGH Elisa Kit 96T/48T
人硫酸褪黑色素(MS)elisa试剂盒 Human melatonin sulfate, MS Elisa Kit 96T/48T
人甲状腺刺激素(LATS)elisa试剂盒 Human Long acting thyroid stimulator, LATS Elisa Kit 96T/48T
人肾上腺髓质素(ADM)elisa试剂盒 Human adrenomedullin, ADM Elisa Kit 96T/48T
人免疫反应性生长激素(irGH)elisa试剂盒 Human Immunoreactive growth hormone, irGH Elisa Kit 96T/48T
人抗利尿激素/血管加压素/加压素(ADH/VP/AVP)elisa试剂盒 Human antidiuretic hormone/vasopressin/arginine vasopressin, ADH/VP/AVP Elisa Kit 96T/48T
人甘丙肽/甘丙素(GAL)elisa试剂盒 Human galanin, GAL Elisa Kit 96T/48T
人促胰液素/分泌素受体(SR)elisa试剂盒 Human secretin receptor, SR Elisa Kit 96T/48T
人雌激素受体(ER)elisa试剂盒 Human Estrogen Receptor, ER Elisa Kit 96T/48T
人超敏生长激素(U S-GH)elisa试剂盒 Human Ultra Sensitive growth hormone, U S-GH Elisa Kit 96T/48T
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