48T-禽呼肠孤病毒（ARV）核酸试剂盒规格

组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

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实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
肝素锂Mouse Inrferon-γ (mIFN-γ)氟

促胰液素;胰泌素p62Dok Antibody二氧烷

麝香草酚Tropomyosin-1/3 (D17B8) Rabbit mAb1,二甲基-哌啶酮

普拉洛芬Olfm4 (D6Y5A) XP® Rabbit mAb (Mouse Specific)亚硝酸正戊酯

普拉洛芬(标准品)Olfm4 (D6Y5A) XP® Rabbit mAb (Mouse Specific)亚麻酸

牛血清白蛋白(BSA);牛血清白蛋白组分五p56Dok-2 Antibody对酰

萘啶酮酸；萘啶酸CD45 (HI30) Mouse mAb (redFluor™ 710 Conjuga)氧甲酰-哌酮 盐酸盐

糖原,α-1,6 葡聚糖,糖元DDR1 Antibody5-羧基噻吩-2-酸

溴化锭(EB)PhosphoPlus® mTOR (Ser2448) Antibody Duet5-溴-1-甲基-1H-吲唑

贝西沙星盐酸盐Phospho-IGF-I Receptor β (Tyr1135) (DA7A8) Rabbit mAb2,6-二羟基-甲基吡啶

甜菜（标准品）Phospho-IGF-I Receptor β (Tyr1135) (DA7A8) Rabbit mAb溴-2-三氟甲

甜菜Phospho-PSD95 (Tyr236/Tyr240) Antibody5-溴靛红酸酐

尿酸Bag1 (3.10G3E2) Mouse mAb5-溴噻吩-2-甲

尿酸(标准品)Phospho-AMPA Receptor 2 (GluA2) (Tyr869/Tyr873/Tyr876) Antibody邻二甲酰甘氨酸

度米芬Phospho-AMPA Receptor 2 (GluA2) (Tyr869/Tyr873/Tyr876) AntibodyN-甲基-基

甜菜，一水Mcl-1 (D5V5L) Rabbit mAb吡啶-2,6-二羧酸

萘酚AS-D-酸酯SATB2 (E8R8H) Rabbit mAb2,9-二甲基-4,7-联-1,10-邻二氮杂菲

硫酸甲酯IGFBP2 Antibody3,6-二羟基邻二甲

白介素15(IL-15)ELISA试剂盒TIF1 gamma/Trim33  转录中介因子Tif1γ100 ul

白介素13(IL-13)ELISA试剂盒Tissue factor  组织因子100 ul

白介素12(IL-12/P70)ELISA试剂盒TFPI/LACI  组织因子途径抑制剂100 ul

白介素12(IL-12/P40)ELISA试剂盒TFPI-2  组织因子途径抑制剂-2100 ul

白介素11(IL-11)ELISA试剂盒TGF-alpha  转移生长因子–α100 ul

白介素10(IL-10)ELISA试剂盒TGF- Beta 1  转化生长因子β1100 ul

白蛋白ELISA试剂盒TGF-Beta 1  转化生长因子β1100 ul

艾杜糖硫酸酯酶(IDS)ELISA试剂盒TIEG1  TGF-β诱导早期应答基因1100 ul

癌胚抗原(CEA)ELISA试剂盒TGF-beta 2  转移生长因子β220 ul
禽呼肠孤病毒(ARV)核酸试剂盒规格CD161抗体(+)-Lyoniresil 9'-O-glucoside中文名：(+)-南烛木树脂酚-9'-O-葡萄糖苷别名：分子式：C28H38O13

L-型电压依赖型钙通道β抗体Hokiol中文名：和厚朴酚别名：分子式：C18H18O2

K-酪蛋白抗体Piperitol中文名：胡椒醇别名：(+)-Piperitol分子式：C20H20O6

20号染色体开放阅读框26抗体Curlignan中文名：别名：分子式：C19H20O7

C2CD4D蛋白抗体7-O-Acetyl-4-O-demethylpolysyphorin中文名：别名：分子式：C24H30O8